Efè a nan manbràn ultrafiltrasyon ak gwosè pò diferan sou retire Endotoxin
Dapre estatistik nou yo, nan pifò ka yo, seleksyon an nan kasèt manbràn ak Ouverture manbràn nan 10kd oswa pi ba ka efektivman entèsepte pi endotoksin, diminye kontni endotoksin nan yon nivo ki ba anpil, ak satisfè bezwen yo nan pifò aplikasyon pou endistri medikal ak pharmaceutique. Nivo diminye kontni endotoksin te diferan ak gwosè pò diferan. Nan sans sa a, nou te fè kèk rechèch, kontni an se jan sa a:
Ki sa ki endotoksin
Endotoxin, ke yo rele tou lipopolysaccharide, lipid A, sous chalè, se yon estrikti inik sou miray deyò miray selil bakteri Gram-negatif (GNB), epi li se yon konplèks ki gen gwo pwa molekilè relatif. Akòz eterojenite chimik endotoxin, mas molekilè relatif endotoxin ki soti nan diferan sous ka varye ant dè milye ak dè dizèn de milye, epi akòz amfifilisite endotoxin, li ka fòme yon asosyasyon nan dlo, ak mas molekilè relatif nan asosyasyon li yo. ka rive nan 400,000 a 1,000,000.
Poukisa yo ta dwe retire endotoxins
1. Wòl endotoxin
Endotoxin gen yon efè tèrmojenik enpòtan sou mamifè yo. Bakteri yo vin toksik lè yo mouri oswa konfòme yo ak lòt selil yo. Yon ti kantite endotoxin (2 ng/kg pwa kò) enjekte nan venn ka lakòz lafyèv, ak gwo dòz ka lakòz twoub sikilasyon ak chòk endotoxin. Dapre dispozisyon farmakope nasyonal la, kontni endotoxin nan yon dwòg oswa yon preparasyon ta dwe pi ba pase limit preskri a. Pou egzanp, pou albumin san moun, limit la nan kontni endotoxin bakteri yo ta dwe mwens pase 2 EU/mL an akò ak Pwosedi Tès pou Endotoxin bakteri nan pwodwi byolojik. Limit la pou endotoxins bakteri nan entèferon yo ta dwe mwens pase 10 EU/mL.
2. Endotoxin kontaminasyon
Endotoxin gen efè byolojik evidan tou de nan vivo ak nan vitro. Nan sistèm selil gratis, endotoxins nan konsantrasyon nanogram yo ka afekte konpòtman an nan kalite espesifik nan selil e menm molekil, konsa afekte aktivite nòmal fizyolojik.
Se poutèt sa, endotoxin se sous polisyon nan pifò materyèl byolojik, ak egzistans li fè anpil tès byolojik ak dwòg parèt rezilta chaotic, ki pote anpil difikilte nan pwodiksyon an.
(1) Kontaminasyon dwòg. Pou egzanp, yon gran varyete medikaman lwès sentèz pa metòd chimik ak medikaman tradisyonèl Chinwa ekstrè nan plant yo ka kontamine pa andotoksin pandan sentèz yo oswa ekstraksyon.
(2) matyè premyè pou pwodiksyon an. Plizyè pwodwi san ak medya selilè kapab tou plis oswa mwens kontamine pandan pwosesis preparasyon an.
(3) Ajan byolojik. Pou egzanp, entèferon, interleukin oswa divès kalite pwoteyin ki ka geri oswa peptides ki fabrike pa teknoloji ADN recombinant, itilize nan E. coli kòm yon konpayi asirans nan ekspresyon nan pwosesis fabrikasyon an, oswa divès kalite faktè ekstèn, li difisil pou fè pou evite kontaminasyon endotoxin.
Lide a nan retire endotoxin pa ultrafiltrasyon
Akòz gwo mas molekilè relatif endotoxin, yo ka itilize manbràn ultrafiltrasyon pou retire endotoxin nan dlo. Seleksyon gwosè pò a ak materyèl manbràn ultrafiltrasyon an depann de pwa molekilè relatif, karakteristik ak kontni pirojèn nan dwòg la trete. Yo nan lòd yo kenbe pifò pirojèn, li nesesè yo sèvi ak yon manbràn ultrafiltrasyon ak yon mas molekilè relatif nan 5000 oswa 10000, nan ki tan presyon an pandan operasyon an pi wo, epi li pa apwopriye pou kèk preparasyon pharmaceutique ki gen gwo mas molekilè relatif. konpozan. Paske retire pirojèn nan pral kenbe oswa adsorb engredyan efikas nan likid la, ak sede a pwodwi anpil afekte.
Depi molekil endotoksin yo chaje negatif anba kondisyon net, seleksyon an nan materyèl chaje pozitivman tankou polysulfone, polyacrylonitrile, polyamid ak lòt manbràn filtraj mikroporous ka amelyore efè a retire nan molekil endotoxin. Anplis de sa, li se tou yon metòd tach dyatom latè sou fim nan seluloz, ak Lè sa a, adsorb pozitif polyelectrolyte sou li pou retire elèv la nan endotoxin. Sepandan, efè a retire nan sa yo manbràn mikroporous chaje sou endotoxin te anpil afekte pa pH. Filtè a gwo twou san fon nan Guidling Teknoloji gen latè diatom, ki ka lib chwazi si yo ajoute chaj pozitif dapre pwosesis itilizatè a. Nan pwosesis la nan retire enpurte tankou selil, debri selil ak pwoteyin divès, estrikti entèn natirèl li yo ki pore ka ogmante chaj la manbràn nan filtraj.
Efè retire endotoxin nan manbràn ultrafiltrasyon ak gwosè pò diferan
Isit la nou diskite sou efè a retire nan manbràn ultrafiltrasyon soti nan plizyè sous diferan nan ka retire endotoxin:
1. Retire endotoxin bakteri nan piki Shengmai pa metòd ultrafiltrasyon
1.1 Entwodiksyon
Piki batman kè se yon kalite solisyon akeuz esterilize ki fèt ak batman kè SAN nan refòm fòm dòz. Li konpoze de ginseng wouj, ophiopogon ak schisandra schisandrae. Li gen efè benefik nan dinamize batman kè qi, ranfòse ak estabilize dezidratasyon, estabilize san presyon, ogmante fòs kontraksyon myokad, e li gen bon efè klinik nan trete sistèm kadyovaskilè ak maladi andokrin.
1.2 Eleman manbràn
Guidling ultrafiltration manbràn (entèrsèpsyon relatif mas molekilè 10,30,100 kDa)
1.3 Metòd eksperimantal
1.3.1 Preparasyon entèmedyè likid ki pwodui batman kè
Gade nan pwosesis preparasyon piki Zhongsheng Mai nan Creole Dwòg Nasyonal (WS3-B{-2865-98-2011) ak revizyon li yo (ZGB2011-48). Peze 100 g nan jinsang wouj, 312 g nan ophiopogon ak 156 g nan schisandra chinensis, yo te ekstrè wouj jinsang pa metòd rflu etanòl, ak ophiopogon chinensis ak schisandra chinensis yo te ekstrè pa metòd distilasyon vapè, epi yo te jwenn 1L nan medsin likid entèmedyè. chak 10 mL te ekivalan a 1 g jinsang wouj, 3 g ophiopogon ak 1.5 g schisandra chinensis).
1.3.2 Ultrafiltrasyon
Yon sèten kantite likid entèmedyè batman kè yo te pran, pH la te ajiste a 7.5, epi yo mete yo nan sistèm nan ultrafiltrasyon trete ak dlo. Apre entèrsèpsyon an nan pwa molekilè relatif 10,30,100 kDa nan manbràn ultrafiltrasyon polyether te ultrafilted, ak sik la ultrafiltrasyon te balanse pou 60min. Apre ultrafiltrasyon an te konplete, yo te kalkile pousantaj rekiperasyon (R) nan ginsenoside Rg1, Re, Rb1 ak schisandrin A. Kontni an nan endotoxin bakteri anvan ak apre ultrafiltrasyon te mezire quantitatively pa metòd turbidity dinamik, ak pousantaj la retire nan endotoxin bakteri nan likid la te kalkile (Q).
R=Yon filtè /Yon primitif ×100%
Q= (C -C filtre) /C ×100%
Nan fòmil la, A se zòn pik nan chak eleman aktif nan ultrafiltrat la, A se zòn pik nan chak eleman aktif nan solisyon dwòg orijinal la, C se kontni an nan endotoxin bakteri nan ultrafiltrat la, ak C se kontni an nan bakteri. endotoxin nan solisyon dwòg orijinal la.
1.4 Detèminasyon pèmeyabilite engredyan aktif
After ultrafiltration of two kinds of ultrafiltration membranes (with the relative molecular weight of 10, 30, 100kDa retained), the permeability of each active component is shown in Table 1. The results showed that with the increase of membrane pore size, the permeability of effective components increased correspondingly. When the pore size of the membrane reaches 100 kDa, the permeability of the effective components is equal to >. 90%, ak tout twa engredyan aktif ka pase nan manbràn ultrafiltrasyon 100 kDa. Zòn nan pik nan chak eleman aktif nan solisyon an ultrafiltrasyon manbràn 100 kDa anvan ak apre chromatogram te konpare pa HPLC, ki endike ke te gen prèske pa gen okenn pèt nan 4 eleman.
1.5 Etid sou efè a retire nan endotoxin bakteri
Chanjman kontni nan endotoxin bakteri nan entèmedyè likid ki pwodui batman kè anvan ak apre ultrafiltrasyon pa manbràn ultrafiltrasyon yo montre nan Tablo 2. Rezilta yo te montre ke sa ki nan endotoxin nan likid orijinal la diminye anpil apre ultrafiltrasyon ak diferan pwa molekilè relatif. Apre 100 kDa ultrafiltrasyon manbràn ultrafiltrasyon, kontni an nan endotoxin nan likid la te pi ba anpil pase valè limit la nan 5.0EU·mL-1 nan piki klinik Shengmai.
1.6 Diskisyon
Nan papye sa a, ki baze sou efè a nan manbràn ultrafiltrasyon ki fèt ak PSO, li te jwenn ke ginsenoside Rg1, Re, Rb1 ak schisandra A te gen prèske pa gen okenn pèt lè yo te itilize manbràn ultrafiltrasyon ak entèrsèpsyon pwa molekilè relatif nan 100 kDa, ak endotoxins bakteri nan likid la ta ka efektivman retire, satisfè kondisyon yo limit klinik. Konpare ak kabòn aktive pou retire pirojèn, teknoloji ultrafiltrasyon ka pa sèlman elimine pwoblèm yo nan adsorption konpetitif ak saturation adsorption, men tou, garanti sekirite nan piki nan yon gwo limit, epi bay baz eksperimantal pou pwosesis la preparasyon nan piki Shengmai.
2. Enfliyans nan manbràn ultrafiltrasyon entèsepsyon ak pwa molekilè nan 10kd sou pwosesis la retire pirojèn nan saline nòmal
2.1 Entwodiksyon
Nan preparasyon an nan pirojèn pwodwi byolojik gratis, li souvan rankontre ke endotoxin ekzojèn lakòz gwo pirojèn, ak istansil yo ka rezoud pa sèk boulanjri ak tranpe idroksid sodyòm, men preparasyon nan gwo echèl nan solisyon an pa apwopriye pou tretman ki anwo a, epi li konsidere kòm yo sèvi ak anbalaj fim tanjansyèl pou solisyon gwo-echèl jwenn kontni endotoxin kalifye.
2.2 Endotoxin retire
2.2.1 Tretman ultrafiltrasyon echantiyon yo
Endotoxin bakteri se pi piti anpil pase bakteri, ak yon dyamèt apeprè 1-50 nm, lipid A se pi piti, ti gwosè ak pwa lejè, ak endotoxin bakteri gen bon rezistans chalè. Anjeneral, tanjansyèl koule ultrafiltrasyon manbràn pake 10kd yo itilize pou entèsepte endotoxin epi pran koule nan tanjansyèl nan solisyon an.
2.2.3 Rezilta eksperimantal
Teknoloji Guidling te itilize materyèl PES 10kd manbràn kasèt pou fè eksperyans mikrofiltrasyon sou likid manje a, ak rezilta yo se jan sa a:
Rezilta yo te montre ke kasèt manbràn ultrafiltrasyon ak pwa molekilè entèrsèpsyon 10kd ki te pwodwi pa teknoloji Guidling ta ka efektivman retire endotoxin ak plis elaji pwodiksyon an.
Konsènan Guidling
Guidling Technology se yon antrepriz nasyonal gwo teknoloji ki konsantre sou biopharmaceutique, kilti selil, pirifikasyon ak konsantrasyon byomedsin, dyagnostik ak likid endistriyèl. Nou te devlope avèk siksè aparèy filtre santrifujeur, ultrafiltrasyon ak kasèt mikrofiltrasyon, filtè viris, sistèm TFF, filtè pwofondè, fib kre, elatriye Ki konplètman satisfè senaryo aplikasyon yo nan biopharmaceutique, kilti selil, ak sou sa. Manbràn nou yo ak filtè manbràn yo lajman itilize nan konsantrasyon, ekstraksyon ak separasyon pre-filtrasyon, mikrofiltrasyon, ultrafiltrasyon ak nanofiltrasyon. Liy anpil pwodwi nou yo, ki soti nan ti, filtraj laboratwa yon sèl-itilize nan sistèm filtraj pwodiksyon, tès esterilite, fèmantasyon, kilti selil ak plis ankò, satisfè bezwen yo nan tès ak pwodiksyon. Guidling Technology ap chèche pou pi devan pou kolabore avèk ou!
