Q Strong Anion Manbràn Kwomatografi
1.Overview Ion echanj chromatografi se yon teknik pou pirifye ki separe biomolekil ki baze sou diferans ki genyen nan pwopriyete chaj yo ak kantite chaj. Piske pifò makromolekil byolojik gen gwoup karboksil oswa idroksil, karakteristik chaj yo ak grandè yo ka ajiste...
Pwodwi Entwodiksyon

1.Apèsi sou lekòl la
Kwomatografi echanj iyon se yon teknik pou pirifye ki separe biomolekil ki baze sou diferans ki genyen nan pwopriyete chaj yo ak kantite chaj yo. Piske pifò makromolekil byolojik gen gwoup karboksil oswa idroksil, yo ka ajiste karakteristik chaj yo ak grandè lè yo kontwole valè pH solisyon tanpon an. Apre biomolekil yo mare nan yon anyon ki chaje opoze oswa mwayen echanj kasyon, se separasyon reyalize lè w chanje fòs iyonik oswa pH faz mobil la, sa ki lakòz molekil ki fèb mare elite an premye, ki te swiv pa molekil fòtman mare.
2. Avantaj pwodwi yo
2.1 Vit ak efikas - reyalize gwo kapasite obligatwa nan pousantaj koule jiska 40 fwa pi vit pase rezin tradisyonèl yo. Konpare ak kwomatografi kabann ki chaje-, tan pwosesis la lè l sèvi avèk kromatografi manbràn redwi pa 30-40 fwa. Pousantaj nan koule operasyon tipik se 10 MV / min.
2.2 Segondè efikasite obligatwa - kromatografi manbràn montre gwo kapasite chaj ak gwo pousantaj koule nan kondisyon gout presyon ki ba, sa ki pèmèt biomolekil chaje yo dwe kaptire nan yon sèl pas.
2.3 Évolutive ak fleksib - seri konplè pwodwi kwomatografi manbràn yo ka satisfè bezwen divès kalite pirifikasyon biomacromolecule, ki kouvri tout etap soti nan devlopman pwosesis rive nan pwodiksyon gwo -echèl. Konsepsyon estriktirèl kapsil-kapsil la sipòte tou de operasyon yon sèl -itilizasyon ak reitilizasyon apre netwaye.
2.4 Amelyore pwodiktivite - Konsepsyon kontra enfòmèl ant minimize anprint enstalasyon an. Lè yo elimine anbalaj kolòn, netwaye, netwaye validation, ak operasyon depo kolòn, pwosesis la mande pou mwens tanpon pou ekilib e yo ka fèt dirèkteman san preparasyon kolòn. Depans travay yo ka redwi jiska 50%.
3. teknik paramèt
3.1 Materyèl estriktirèl
|
Echèl laboratwa |
ti echèl |
echèl pilòt |
echèl pwodiksyon an |
|
|
volim manbràn |
0.2ml |
5ml |
140ml |
5L |
|
Estrikti sipò manbràn: |
polypropylène (PP) |
|||
|
lojman manbràn |
polypropylène (PP) |
|||
|
O bag |
silikone |
|||
3.2 Karakteristik fonksyònman
|
Echèl laboratwa |
ti echèl |
echèl pilòt |
echèl pwodiksyon an |
|
|
volim manbràn |
0.2ml |
5ml |
400ml |
5L |
|
Pousantaj koule rekòmande |
1-6ml / min |
25-150ml / min |
2-12L/min |
25-150L/min |
|
Maksimòm tanperati opere |
35 degre |
|||
|
Maksimòm presyon opere |
3bar (25 degre) |
|||
|
Diferans presyon maksimòm |
3bar (25 degre) |
|||
|
Kondisyon depo: |
20% etanòl solisyon akeuz |
|||
Lavi sèvis kwomatografi Q manbràn konparab ak kwomatografi jèl agarose.



Figi 1. Chanjman nan kapasite chajman chromatografi manbràn apre plizyè itilizasyon kontwole pa BSA
Anplis de sa, nou evalye efikasite nan retire nan kromatografi manbràn pou pwoteyin selil lame ak asid nikleyik. Rezilta yo se jan sa a.
|
|
ADN |
HCP |
|||||
|
|
Rekiperasyon IgG |
Kontni (pg/mg nan IgG) pa RT PCR |
Retire Faktè |
Kontni (ng/mg nan IgG) pa Elisa |
Retire Faktè |
||
|
Kouri |
% |
Anvan Q Manbràn |
Apre Q Manbràn |
Log |
Anvan Q Manbràn |
Apre Q Manbràn |
Log |
|
1 |
96.7 |
423 |
1.2 |
2.55 |
7 |
4.8 |
0.16 |
|
2 |
97.4 |
438 |
1.3 |
2.53 |
7 |
4.9 |
0.15 |
|
3 |
94.7 |
513 |
1.3 |
2.60 |
6 |
1.9 |
0.50 |
|
4 |
95 |
32 |
0.9 |
1.55 |
6 |
4.2 |
0.15 |
|
5 |
96.3 |
45 |
1.1 |
1.61 |
8 |
5.2 |
0.19 |
|
6 |
96.5 |
158 |
0.7 |
2.35 |
8 |
6.2 |
0.11 |
|
7 |
96.4 |
267 |
1.9 |
2.15 |
9 |
7.2 |
0.10 |
|
8 |
96.8 |
298 |
2.3 |
2.11 |
9 |
8.2 |
0.04 |
|
9 |
97.1 |
746 |
1.5 |
2.70 |
4 |
2 |
0.30 |
|
10 |
96.6 |
39 |
1 |
1.59 |
4 |
1.5 |
0.43 |
Tablo 1. Pousantaj retire ADN ak pwoteyin selil lame nan materyèl IgG CHO-eksprime lè l sèvi avèk Kwomatografi manbràn Q.
Yon seri de eksperyans demontre ke kwomatografi manbràn Q ka efektivman retire enpurte pandan w ap kenbe rekiperasyon IgG segondè sib.
Anplis de sa, nou konpare chromatografi manbràn Gudiling ak mak enpòte, ak done kapasite loading yo jan sa a:
|
Kapasite chaj (mg/ml) |
Sartorius |
PALL |
Guidling |
|
BSA |
29 |
60 |
45 |
|
SOD |
25 |
40 |
35 |
|
Pwoteyin A |
27 |
45 |
40 |
|
Tripsin |
30 |
56 |
44 |
Tablo 2. Chaje pèfòmans diferan pwoteyin sou pwodwi nou yo ak pwodwi konkiran yo
Evalyasyon jeneral montre ke kapasite chaje nou an konparab ak pwodwi enpòte,

Figi 2.Sèvi ak yon modil kwomatografi manbràn Q, BSA te itilize kòm pwoteyin estanda pou evalye kapasite obligatwa a. Kapasite obligatwa dinamik la te konpare ak pwodwi enpòte yo. Rezilta yo te montre ke pi fò nan pwoteyin sib la ta ka kaptire ak eliye ak150 mM NaCllè w ap itilize BSA kòm pwoteyin modèl.
Atravè kondisyon elisyon diferan, nou te jwenn ke konpòtman an elisyon nan kromatografi manbràn se menm jan ak sa yo ki nan kwomatografi jèl agarose. Pite pwoteyin ki eliye nan diferan konsantrasyon sèl varye anpil. Nan devlopman aktyèl pwosesis ak pwodiksyon, li nesesè pou detèmine quantitatively kondisyon yo elisyon optimal yo nan lòd yo jwenn pwoteyin sib la ak pite segondè.
4.Ka aplikasyon tipik
Retire ADN, viris, pwoteyin selil lame (HCP), ak andotoksin
Kaptire plasmid, viris, ak pwoteyin, ak pirifikasyon oligonukleotid
5. Pwosedi Fonksyònman
5.1: Preparasyon ak Asanble Ekipman:
5.1.1: AKTA chromatography sistèm: Enstale modil chromatografi manbràn nan yon fason ki sanble ak kolòn chaje. Asire w ke direksyon flèch la sou modil la konsistan avèk direksyon koule manje a. Konekte sistèm nan lè l sèvi avèk konektè Luer oswa Fittings Tri-Clamp.
5.1.2 Mete to koule inlet la sou 5–10 MV/min epi sèvi ak tanpon ekilib la pou retire lè nan sistèm nan. Apre asire ke pa gen okenn bul lè nan kouran an priz, konekte priz la pèmeat ak sistèm nan chromatografi.
5.2:Pre-sèvi ak Tretman:
5.2.1:
Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 MV pou asire manbràn lan rive nan ekilib.
5.2.2:
At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 MV pou asire manbràn lan rive nan ekilib.
5.3 Pwosesis Kwomatografi
5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 MV jiskaske manbràn lan rive nan ekilib.
5.3.2 Apre yo fin filtre echantiyon an pre-nan yon filtè 0.22 μm, chaje l sou kolòn nan jiskaske tout echantiyon an aplike oswa yo rive jwenn kapasite kwomatografi a obligatwa.
5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 MV jiskaske siyal UV la desann sou liy debaz la.
5.3.4 Fè gradyan oswa elisyon lineyè dapre pwotokòl ki fèt la, epi kolekte fraksyon jan sa nesesè.
5.4 CIP Post-itilize Tretman - Aparèy Kwomatografi manbràn CIP
5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 MV jiskaske siyal UV la desann anba liy debaz la.
5.4.2 Apre sikile pou 30 minit, chanje nan lave dlo jiskaske pH la rive nan 7-8, Lè sa a, chanje nan 20% etanòl epi kontinye lave jiskaske konduktiviti a estabilize.
5.5, Manbràn Kwomatografi Depo:
Apre itilizasyon ak fini CIP, modil manbràn an ka demonte epi estoke nan 20% etanòl, oswa kenbe sou entènèt nan tanperati chanm nan 20% etanòl. Solisyon etanòl la ta dwe detanzantan ranplase ak enspekte.
6. Enfòmasyon sou kòmande
Q Bonjan Anion-Echanj Manbràn Chromatografi Kapsil Filtè
|
Echèl laboratwa |
ti echèl |
echèl pilòt |
echèl pwodiksyon an |
|
|
Modèl pwodwi |
IEXQ0002ES |
IEXQ0050ES |
IEXQ0400ES |
IEXQ5000ES |
|
volim manbràn |
0.2ml |
5ml |
400ml |
5L |
Baj popilè: q fò kwomatografi anion manbràn, Lachin, Swèd, manifaktirè, faktori, wholesale, esansyèl, nan stock, echantiyon gratis
Ou ka renmen tou
Voye rechèch












