Endistriyèl-Pwosesis pirifikasyon an deval pou vaksen kont rinotracheit enfektye bovin (IBR) — Seksyon "Ultrafiltrasyon"
Rinotracheit enfektye bovine (IBR) ki te koze pa enfeksyon ak viris rinotracheit enfektye bovine (IBRV), konnen tou kòm èpèsvirus bovin tip 1 (BHV-1). Se maladi a sitou karakterize pa sentòm respiratwa ak avòtman. Anplis manifestasyon klinik sa yo, IBR ka mennen nan pwodiksyon lèt redwi nan bèf letye ak diminye pran pwa nan bèt vyann bèf, sa ki lakòz pèt ekonomik enpòtan pou fèm bèt.
Maladi a se imunosuppressive nan lanati. Lè yo rive kòm yon sèl enfeksyon, patojèn li relativman ba; sepandan, lè enfeksyon melanje ak lòt maladi viral oswa bakteri rive, gravite a ak mal ogmante anpil. Vaksen se metòd ki pi efikas pou prevansyon ak kontwòl, ak de kalite prensipal vaksen ki disponib: vaksen vivan atenue ak vaksen inaktive. Kounye a, vaksen rinotracheit enfektye bovins yo itilize nan fèm yo se vaksen ki pa aktive sitou.
Vaksen vivan atenue yo karakterize pa fò iminojenisite, rapid aparisyon nan iminite, ak yon dire long nan pwoteksyon (anjeneral plis pase sis mwa). Yo souvan itilize pou vaksinasyon ijans pandan epidemi maladi. Sepandan, yo pote risk potansyèl pou viris koule, poze risk pou bèf ansent, epi yo pa ka itilize nan bèt ki enfekte latans men ki asymptomatik.
Vaksen inaktive yo karakterize pa gwo sekirite, ki pa gen okenn risk pou yo gaye viris oswa retounen nan virulans, epi yo konsidere kòm absoliman san danje. Yo ka itilize nan bèt nan tout etap, ki gen ladan bèf ansent, ti towo bèf, ak towo bèf elvaj. Sepandan, aparisyon iminite a relativman dousman epi dire pwoteksyon an pi kout, kidonk vaksinasyon rapèl yo anjeneral obligatwa. Nan kèk ka, efikasite pwoteksyon an ka pi fèb pase vaksen vivan atenue.
Kèlkeswa si yon vaksen vivan atenue oswa yon vaksen inaktive yo itilize, pwosesis pirifikasyon an ka divize an kat etap prensipal: rekòt ak klarifikasyon → konsantrasyon ak pirifikasyon prensipal → pirifikasyon polisaj → inaktivasyon / filtraj esteril ak fòmilasyon.
Konsantrasyon se yon etap debaz nan pwosesis pirifikasyon en vaksen yo, imedyatman apre klarifikasyon. Objektif prensipal li se redwi rapidman rekòlte gwo-volim, ba-konsantrasyon viris solisyon klarifye nan yon ti-volim, gwo-fòm konsantrasyon pandan w ap kenbe byoaktivite viral. Sa kreye kondisyon ki nesesè yo pou etap pirifikasyon amann ki vin apre gwo-rezolisyon men ki ba-kapasite, tankou kwomatografi.
Etap sa a anjeneral te pote soti lè l sèvi avèk ultrafiltrasyon tanjansyèl koule (TFF). Prensip la se jan sa a: solisyon an manje viral koule paralèl ak sifas la nan yon manbràn ultrafiltrasyon ak yon gwosè pò espesifik. Anba presyon, ti molekil tankou dlo, sèl, ak sèten enpurte pase perpendicularly nan manbràn nan epi yo retire, pandan y ap patikil viris entak, ki se pi gwo pase porositë manbràn yo, yo kenbe, kontinyèlman resikle, ak konsantre. Konpare ak santrifijasyon tradisyonèl gwo vitès, metòd sa a pi dou pou viris frajil tankou IBRV, ki gen yon anvlòp lipid. Li efektivman diminye viris domaj estriktirèl ak pèt aktivite ki te koze pa gwo fòs taye e li pi fasil pou echèl lineyè -up pou pwodiksyon endistriyèl.
Yon operasyon konsantrasyon siksè se byen lwen plis pase tou senpleman diminye volim. Pwen kle pou optimize pwosesis yo enkli: jisteman kontwole presyon transmembran ak pousantaj koule manje balanse efikasite filtraj pandan y ap minimize polarizasyon konsantrasyon ak fouling manbràn; chwazi materyèl manbràn apwopriye ak gwosè pò yo asire retansyon viris segondè ak koule pèmete; ak jwenn balans ki pi bon nan mitan rekiperasyon viris, faktè konsantrasyon, ak tan pwosesis. Sispansyon viral konsantre non sèlman reyalize yon tit siyifikativman pi wo, men tou li atenn pirifikasyon preliminè lè li retire yon gwo pòsyon nan enpurte dlo -idrosolubl. Sa a bay volim ki nesesè ak fondasyon konsantrasyon pou etap rafineman kritik ki vin apre, tankou kwomatografi ak tretman nuclease, ki fè konsantrasyon yon sant efikasite santral nan tout pwosesis la en.
Segondè dyafiltrasyon se yon etap enpòtan nan pirifikasyon en vaksen an, pozisyone apre pirifikasyon amann ak anvan fòmilasyon. Li se tipikman fèt apre kwomatografi ak tretman nukleaz. Objektif debaz li se pa premye konsantrasyon, men echanj sistèm ak ajisteman egzak nan kondisyon fòmilasyon final yo. Pwosesis la fèt nan yon sistèm ultrafiltrasyon tanjansyèl (TFF), kote fre, pwòp tanpon fòmilasyon yo kontinyèlman ajoute nan sikile konsantre viris solisyon an, pandan y ap sòlvan orijinal la ak enpurte ti -molekil yo retire. Operasyon sa a efektivman ak dousman elimine sèl rezidyèl, solvang òganik, pwodwi degradasyon nuclease, ak tras enpurte idrosolubl ki rete nan pwosesis pou pirifye.
Kle a se kenbe volim konstan oswa aplike ti ajisteman konsantrasyon pou asire ke konsantrasyon viris la satisfè espesifikasyon fòmilasyon yo. Pou viris frajil ak anvlòp tankou viris rinotracheit enfektye bovine (IBRV), anviwònman idrodinamik dou nan dyafiltrasyon segondè enpòtan anpil pou konsève entegrite patikil ak iminojenisite. Finalman, etap sa a bay yon fondasyon solid pou inaktivasyon ki vin apre (si sa nesesè), adisyon adjuvant oswa estabilize, ak ranpli final la, asire ke pwodwi final la antre nan fòmilasyon an ak eleman defini, kondisyon inifòm, ak bon konpatibilite. Se poutèt sa, se youn nan etap prensipal yo pou asire sekirite vaksen an, estabilite, ak konsistans pakèt-a-.
IBRV se yon viris ADN lineyè ki gen anvlòp, doub-chaj ki gen yon anvlòp apeprè esferik. Patikil IBRV ki gen matirite gen yon dyamèt apeprè 160-230 nm. An konsekans, lè l sèvi avèk manbràn ultrafiltrasyon 100, 300, oswa 500 kDa ka kenbe IBRV pandan y ap retire kèk pwoteyin ki kontamine. Pousantaj rekiperasyon ultrafiltrasyon nan kasèt manbràn Jiuling Teknoloji varye ak kalite materyèl manje, men jeneralman rive nan 90-95%.