Etid sou kapasite pou retire viris nan antikò monoklonal pwosesis en

Nov 18, 2024

Pwodui bioteknoloji ki sòti nan liy selil yo ka gen risk pou yo kontaminasyon viris - limit la depann de yon kantite faktè, tankou sous preparasyon an, matyè premyè yo itilize, sistèm pwodiksyon an, reyaktif pou pirifye ak ekssipyan. Etidye retire oswa inaktivasyon viris nan pwosesis fabrikasyon an se yon etap kle nan diminye potansyèl la pou transmisyon iatrogenic nan viris patojèn epi konsa diminye risk la, ki se esansyèl pou sekirite pwodwi yo. Anvan pwodwi byolojik ka antre nan esè klinik yo epi yo dwe mache, yo dwe demontre pwosesis pwodiksyon yo gen kapasite nan retire viris li te ye ak sipoze.

Rechèch sou kapasite pou retire viris la anjeneral lè w ajoute viris endikatè tit li te ye a nan pwodwi entèmedyè a nan diferan etap pwodiksyon, Lè sa a, detèmine tit viris rezidyèl nan echantiyon an trete pa yon pwosesis espesifik, epi finalman evalye valè rediksyon boutèy la (LRV) nan tit viris la. Etap pwosesis pou LRV Pi gwo pase oswa egal a 4log10 jeneralman konsidere kòm etap efikas pou retire viris. Pwosesis la ak LRV<41og10 can be considered as helpful to increase the total virus clearance in the production process. However, due to the limitations of virus verification, the process with LRV≤11og10 has little significance for virus removal, and its LRV value is not included in the total amount of the production process.

Lè w ap itilize metòd pwosesis pwodiksyon simulation (pwosesis redwi), li nesesè pou desine yon rechèch rezonab viris retire / inaktivasyon ak tès plan ki gen rapò ak pwosesis pwodiksyon aktyèl la osi lwen ke posib, espesyalman etap pwosesis pwodiksyon efikas. Pwosesis la simulation ta dwe estrikteman konsistan avèk pwosesis aktyèl la an tèm de paramèt tès ak kondisyon kontwòl.

Viris endikatè komen yo montre nan Tablo 1.

Nan etap envestigasyon Aplikasyon pou nouvo medikaman (IND), yon pwodwi biotech mande pou etid sou clearance viral pou omwen 2 viris modèl, anjeneral, chwazi yon retroviris (X-MuLV) ak yon parvoviris (MMV). Pandan faz aplikasyon pou lisans byolojik (BLA), etid pou retire viris yo anjeneral fèt lè l sèvi avèk 3-5 viris espesifik/ki pa espesifik ak 3-5 etap pwosesis yo evalye pou demontre ke pwodwi a gen yon faktè sekirite adekwa nan yon pèspektiv sekirite viris. Akòz diferan direktiv lakay ak aletranje, gen kèk diferans nan etap verifikasyon clearance viris yo itilize pou deklarasyon. Yo montre pwogram verifikasyon clearance viris yo souvan nan pwosesis pwodiksyon mAb yo nan Tablo 2.

Apati 2009, pwodwi antikò monoklonal yo te soumèt bay FDA pou IND ak BLA, chromatografi afinite Pwoteyin A, pH ki ba, chromatografi echanj aniyon AEX (mòd pénétration koule), chromatografi echanj kasyon CEX (obligatwa - mòd elisyon), ak validation clearance viris eksepte. filtraj viris yo se fanmi viris endikatè ki pi souvan itilize yo epi yo montre mwayen ak seri efè clearance yo nan Figi 1.

Pou retroviris, eksepte CEX, ki gen yon LRV apeprè 3log10 (jan yo montre nan tablo A-bar nan Figi 1), lòt pwosesis yo te gaya (LRV pi gwo pase oswa egal a 4log10). Èpèsviris ak retroviris yo gen efè clearance menm jan ak LRV > 4log10 (jan yo montre nan tablo B-ba a nan Figi 1). Ti viris san anvlòp, tankou parvoviris, pi difisil pou retire yon fason efikas, yo rezistan a tretman chimik, epi yo pa fasil bloke pa filtè (yo montre nan tablo C-bar nan Figi 1). Se sèlman AEX ak ti filtè viris ki te efikas nan retire parvoviridae (mwayèn LRV > 4log10).

Pwosesis yo montre nan Figi 1 yo se ProteinA, AEX (mòd pénétration koule), CEX (mòd konkomitasyon-elisyon), inaktivasyon pH ki ba ("enkonplè "kont" konplè "retire), ak gwo ak ti ouvèti deviris filtraj.

Distribisyon valè LRV pou chak pwosesis yo montre nan Figi 2. Etid yo ak 0 ~ 21og10 yo te klase kòm gwoup LRV ki ba, ak moun ki gen plis pase 6log10 yo te klase kòm gwoup LRV segondè pou analiz konparatif.

Pa te gen okenn korelasyon enpòtan ant valè LRV nan pwosesis Pwoteyin A ak tanpon balans/lave, filler, konpozisyon eluyan ak valè pH elisyon. Denominatè komen nan gwoup LRV ki ba a se ke materyèl la se byen konplèks, epi li ka ke entèraksyon an konplèks nan materyo ak filler afekte negativman kapasite nan kolòn nan chromatografik yo retire viris.

Strauss et al. te montre ke pH ak konduktiviti echantiyon AEX ka afekte LRV la. Sepandan, rezilta estatistik yo nan Miesegaes et al te montre ke, menm jan ak ProteinA, LRV nan AEX (mòd pénétration koule) pa te gen okenn korelasyon enpòtan ak diferan tanpon, file, pH ak konduktiviti, ki ka akòz optimize nan pH ak konduktiviti. nan kondisyon pwosesis ka yo rapòte.

Viris retire pa pwosesis CEX se pa gaya ase. Pa te gen okenn korelasyon enpòtan ant LRV nan gwoup LRV segondè ak tanpon, nivo eksperyans, oswa nenpòt pwopriyete kolòn kwomatografik, tankou wotè kolòn ak kalite résine. Sepandan, ekilib/chajman ak valè pH elisyon yo itilize nan etid LRV segondè yo te tou de pi ba, nan 5.3± 0.2; Nan gwoup LRV ki ba, pH la te 6.0±0.2. Yon lòt faktè se ke konsantrasyon sèl la nan tanpon an ka lakòz tou diferans valè LRV. Tanpon ki te itilize nan etid LRV ki ba a te gen yon konsantrasyon sèl ki pi wo, ak yon konsantrasyon mwayèn 290±120 mM nan solisyon loading/balanse ak 340±70 mM nan eluyan an, pandan y ap konsantrasyon NaCl nan etid LRV segondè yo te 58. ± 27 mm ak 183 ± 31 mm respektivman.

Nan pwosesis Low pH la, pH se yon paramèt pwosesis kle, epi yon pH 3.8 ase pou inaktive retroviris la pa degre. Gwoup LRV ki ba a te gen yon pH 3.9, pandan ke etid LRV segondè te gen yon pH 3.4.

Pou tou de ti ak gwo filtè ouvèti, valè LRV nan retire MuLV pa te mwens pase 2log10, epi sèlman 1% nan etid yo te anba a 3log10 (yo montre nan kolòn yo h ak i nan Figi 2). Clearance an jeneral nan retroviris pa filtè viris gwo ouvèti te pi ba pase sa ki pa filtè viris ti ouvèti (jan yo montre nan tablo C-bar nan Figi 1). Rezon prensipal ki afekte rezilta nan retire parvovirus se diferan kalite filtre. An jeneral, filtrage anti-viris kapab fiable retire viris.

Pwosesis yo se Pwoteyin A (a), mòd pénétration AEX (b), CEX obligatwa - mòd elisyon (c), AEX obligatwa Ⅰ mòd elisyon (d), inaktivasyon pH ki ba ("enkonplè "ak" konplè "clearance) (e ~ g), ak gwo gwosè pò (h) ak ti gwosè pò (i ~ j) filtraj deviris (kote, yon ~ i: Retrovirus; j: Parvovirus).

Devlopman kontinyèl ak inovasyon nan jaden an nan pwosesis biopharmaceutique en pral inevitableman pote sou inovasyon nan evalyasyon clearance viris. Avansman nan pwosesis en ak en-tankou bioprosesis kontinyèl kouran-te fè li nesesè pou evalye ak etabli pwosesis efikas ak solid pou retire viris. Pandan koule kontinyèl, etap tankou inaktivasyon viris ak filtraj viris yo toujou espere fèt nan mòd pakèt. Malgre ke kapasite nan retire viris nan pwosesis kwomatografik nan mòd koule kontinyèl pa ta dwe sibstansyèlman diferan de sa yo ki nan pwosesis pakèt, li dwe sipòte pa done.

Soti nan yon pèspektiv sekirite virolojik, sekirite ekselan endistri byopharmaceutique a ka lajman dwe atribiye a aderans strik endistri a nan twa estrateji kle pou sekirite viral: byen apwovizyone ak tès nan sous materyèl ak selil bank, dokimante evalyasyon clearance viral (etid validasyon viris), ak tès viral nan pwosesis la. Karakteristik dwòg byolojik ki te pwodwi pa substrats selil roman yo ka chanje ak diferan risk, epi yo oblije bon estrateji jesyon risk pou asire sekirite dwòg byolojik. Teknoloji Guidling te gen eksperyans ekip teknik pwofesyonèl, ki kouvri pwosesis filtraj soti nan ti jijman, jijman pilòt, nan pwodiksyon gwo echèl, manbràn nou yo ak filtè manbràn yo lajman ki itilize nan pre-filtrasyon, mikrofiltrasyon, ultrafiltrasyon, konsantrasyon nanofiltrasyon, ekstraksyon ak separasyon; Liy anpil pwodwi nou yo, ki soti nan ti filtraj laboratwa yon sèl-itilize nan sistèm filtraj pwodiksyon oryante, tès esterilite, fèmantasyon, kilti selil ak plis ankò, asire pwodiktivite ogmante.

Jiuling asire bon jan kalite pwodwi kòm premye endikatè a, nan pouswit "diminye depans, ogmante efikasite" sou wout la yo eksplore, kap pou pi devan pou travay avèk ou nan lavni an fè fas a defi yo nan endistri a epi chèche pi bon devlopman.

On: Ka pataje|Pwosesis koleksyon vaksen senp ak efikas

Pwochen: Etid sou aplikasyon filtraj gwo twou san fon nan pwosesis pwodiksyon vaksen kont maladi aft ak bouch